By this author

Development of multiplex real-time RT-PCR to determine the expression level of Toll-like receptor genes

Issue number 1 from 01.01.2025

Анализу экспрессии генов иммунного ответа отводится важная роль в изучении взаимодействий организма-хозяина и инфекционного агента. Существует много подходов к проведению такого анализа, однако проблемой остается выбор единого стандарта для нормализации данных. В настоящей работе разработана основанная на мультиплексной ОТ-ПЦР в режиме реального времени система анализа экспрессии генов HPRT1, SDHA, GAPDH и TBP, отобранных в качестве потенциальных референсных генов. С использованием алгоритмов geNorm и BestKeeper на основе экспрессии двух генов — HPRT1 и SDHA сформирован стабильный индекс, который применили при расчете нормализации уровня экспрессии генов Тоll-подобных рецепторов: TLR1, TLR2, TLR4, TLR6 и TLR8. Значения экспрессии генов Тоll-подобных рецепторов в выборке условно здоровых лиц характеризовались высокой стабильностью и положительной взаимной корреляцией (за исключением TLR6), что может указывать на общие механизмы регуляции экспрессии этих генов и подтверждает возможность использования разработанной мультиплексной системы для анализа экспрессии генов иммунного ответа.

3 0