Нетрадиционные галоголерантные дрожжи Debaryomyces hansenii имеют большое значение в биотехнологии и пищевой промышленности, а в фундаментальных исследованиях служат моделью для изучения молекулярных механизмов устойчивости к повышенной солености и осмотическому давлению. Ранее нами был создан эффективный способ редактирования генома D. hansenii с помощью системы CRISPR/Cas9, появление которого стимулирует дальнейшее изучение структуры и физиологической роли путей репарации двухцепоченных разрывов ДНК у D. hansenii. Цель настоящей работы – оценить участие ключевых компонентов системы репарации двухцепоченных разрывов ДНК по механизму соединения негомологичных концов (NHEJ) в устойчивости D. hansenii к соединениям, повреждающим ДНК и вызывающим окислительный, высокосолевой и осмотический стресс. С помощью системы CRISPR/Cas9 получены мутантные штаммы с нокаутом генов DEHA2F10208g (DhKU70), DEHA2B01584g (DhKU80) и DEHA2G04224g (DhLIG4), кодирующих ключевые компоненты NHEJ. Впервые показано, что мутантные штаммы, в отличие от штамма дикого типа, чувствительны к химическим соединениям, повреждающим ДНК, а также к соединениям, вызывающим окислительный стресс. Осмотический и высокосолевой стресс, а также ванилин не вызывают существенных изменений в скорости формирования колоний мутантных штаммов. Интересно, что мутантные штаммы проявляют повышенную устойчивость к кофеину по сравнению со штаммом дикого типа. Полученные данные показывают, что система NHEJ D. hansenii играет значительную роль в ответе на ДНК–повреждающий и окислительный типы стресса. Важность системы NHEJ в процессах поддержания гомеостаза дрожжевой клетки необходимо учитывать при создании штаммов-продуцентов ценных веществ.
Индексирование
Scopus
Crossref
Высшая аттестационная комиссия
При Министерстве образования и науки Российской Федерации